EDO酶標(biāo)板是酶聯(lián)免疫反應(yīng)實驗中的重要載體工具,分為可拆和不可拆的,一般用的較多的是可拆的酶標(biāo)板。在使用時,按照以下步驟操作:
1、加樣品:將標(biāo)本稀釋液加到包被板內(nèi),將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1:20的比例稀釋后取10ul加入到EDO酶標(biāo)板的反應(yīng)孔內(nèi)。
2、加對照:加入陰性對照3孔,陽性對照1孔,還有100ul的對照血清。
3、進行溫育:將反應(yīng)板震蕩,使樣品充分的混勻,置于37℃的溫箱或者水浴反應(yīng)20分鐘的時間。
4、洗板:用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時候應(yīng)該將反應(yīng)板孔內(nèi)的容物傾出,將洗滌液注滿反應(yīng)孔的位置,然后放置30秒鐘后用力甩去,這樣的動作重復(fù)5次后開始拍干。機洗需要進行5次,每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿,然后停留30秒鐘后吸盡拍干。
5、加酶標(biāo)工作液:在每孔內(nèi)加入100ul的酶標(biāo)工作液,放置到37℃的溫箱中,反應(yīng)20分鐘后洗板5次,洗板的操作和上述步驟4是相同的。
6、這是反應(yīng)的后一步,就是顯色和終止反應(yīng):將底物50ul加到反應(yīng)孔內(nèi),37℃條件下避光顯色10分鐘的時間。在每孔內(nèi)加入終止液50ul混勻用以終止反應(yīng)。
以上是EDO酶標(biāo)板使用的具體步驟,在使用前可使用后要經(jīng)過消毒和清洗處理,消毒方式需認(rèn)真閱讀說明書進行選擇,要注意有些材料是不能進行高溫消毒的。